—、生殖道细胞学检查

女性生殖道细胞包括来自阴道、子宫颈管、子宫及输卵管的上皮细胞。生殖道脱落细胞包括阴道上段、子宫颈阴道部、子宫、输卵管及腹腔的上皮细胞，其中以阴道上段、宫颈阴道部的上皮细胞为主。生殖道上皮细胞受性激素的影响可出现周期性的变化。检查生殖道脱落细胞可反映其生理和病理变化。但生殖道脱落细胞检查发现恶性细胞只能作为初步筛选，还需进一步组织学检查才能确诊。

（一）生殖道细胞学检查取材、制片及相关技术

1.涂片种类及标本采集  采取标本前24小时内禁止性生活、阴道检查、阴道灌洗或用药。取材用具必须无菌干燥。

（1）阴道涂片  主要了解卵巢或胎盘功能。对已婚女性，一般在阴道侧壁上1/3处用小刮板轻轻刮取浅层细胞，避免将深层细胞混入而影响诊断。将浅层细胞薄而均匀地涂于玻片上，置 95％乙醇中固定。对无性生活女性，可将消毒棉签用生理盐水浸湿然后深入阴道，在其侧壁上1/3处轻轻卷取细胞，取出棉签，在玻片上涂匀并固定。

（2）宫颈脱落细胞学检查  是筛查早期宫颈癌的主要方法：①宫颈刮片：传统的宫颈刮片取材应在宫颈外口鳞－柱状上皮交界处，以宫颈外口为圆心，用木质铲形刮板轻轻刮取一周，取出刮板，在玻片上向一个方向涂片，涂片经固定液固定后显微镜下观察。应注意避免损伤组织引起出血而影响检查结果。该取材方法获取细胞数目较少，制片也较粗劣，目前应用已逐渐减少。②薄层液基细胞学技术：改用特制的刷子取材，拭净宫颈表面分泌物，将“细胞刷”置于宫颈内，达宫颈外口上方10mm左右，在宫颈内旋转360°使细胞黏附在取样刷上后取出，立即置入有细胞保存液的小瓶中，薄层液基细胞学制片，使单层细胞均匀地分布在玻片上，提高了宫颈高度病变的灵敏度和特异度。

（3）宫颈管涂片  疑为宫颈管癌，或绝经后的妇女由于宫颈鳞－柱状上皮交界处退缩到宫颈管内，为了解宫颈管情况，可行此检查。先将宫颈表面分泌物拭净，用小型刮板进入宫颈管内，轻刮一周做涂片。

（4）宫腔吸片  怀疑宫腔内有恶性病变时，可采用宫腔吸片检查。较阴道涂片及诊刮阳性率高。选择直径1~5mm不同型号塑料管，一端连于干燥的注射器，另一端送入宫腔内达底部，上下左右转动方向，轻轻抽吸注射器，将吸出物涂片、固定、染色。取出吸管时停止抽吸，以免将宫颈管内容物吸入。宫腔吸片标本中可能含有输卵管、卵巢或盆腹腔上皮细胞成分。此外，还可用宫腔灌洗获取细胞，用注射器将10mL无菌生理盐水注入宫腔，轻轻抽吸洗涤内膜面，然后收集洗涤液，离心后去沉渣涂片。此法简单，取材效果好，适合于绝经后出血女性。

（5）局部印片  用清洁玻片直接贴按在病灶处做印片，经固定、染色、镜检。常用于外阴及阴道部位的可疑病灶。

2.染色方法  最常用的是巴氏染色法，可用于检查雌激素水平或查找癌细胞。此外，还有邵氏染色法和其他改良染色法。

3.辅助诊断技术  包括免疫组化、原位杂交技术、影像分析、流式细胞技术及自动筛选或人工智能系统等。

（二）正常生殖道脱落细胞的形态特征

1.鳞状上皮细胞  可分为底层、中层、表层。其生长与成熟受雌激素影响。

（1）底层细胞  圆形或椭圆形，内底层细胞为中性粒细胞的4~5倍，外底层细胞则为其8~10倍，巴氏染色胞质蓝染，核大而圆。

（2）中层细胞  接近底层者细胞呈舟状，接近表层者细胞大小与形状接近表层细胞。胞浆巴氏染色淡蓝，核呈圆形或卵圆形，染色质疏松为网状核。

（3）表层细胞  细胞大，为多边形，胞浆薄而透明，呈粉染或淡蓝，核小固缩。

2.柱状上皮细胞  包括宫颈黏膜细胞和子宫内膜细胞。

（1）宫颈黏膜细胞  分为黏液细胞和带纤毛细胞。黏液细胞呈高柱状，核在底部，呈圆形或卵圆形，染色质均匀分布，胞质内有空泡，易分解而留下裸核。带纤毛细胞呈立方形或矮柱状，带有纤毛，核为圆形或卵圆形，位于细胞底部，胞质易退化融合成多核，多见于绝经后。

（2）子宫内膜细胞  较宫颈黏液细胞小，细胞为低柱状，为中性粒细胞的l~3倍；核呈大小、形状一致的圆形，多成堆出现，胞浆少，边界不清。

3.非上皮成分  有吞噬细胞、白细胞、淋巴细胞、红细胞等。

（三）生殖道脱落细胞在妇科肿瘤诊断中的应用

1.癌细胞特征  主要表现在细胞核、细胞及细胞间关系的改变。

2.宫颈／阴道细胞学诊断的报告形式  主要为分级诊断和描述性诊断。目前多采用描述性诊断（TBS）分类法诊断。现行的TBS报告系统包括3部分：评价涂片质量，包括细胞量与鳞－柱两种上皮细胞的分布；描述有关发现，做出诊断；描述对诊断能提供依据的细胞成分和形态特征。

（1）感染  原虫、细菌、真菌、病毒。

（2）反应性和修复性改变  包括细胞对炎症、损伤、放化疗、宫内节育器及萎缩性阴道炎、激素治疗等出现的反应或修复性改变。

（3）鳞状上皮细胞异常  ①不典型鳞状细胞（ASC）：包括无明确诊断意义的不典型鳞状细胞（ASC - US），和不排除高级别鳞状上皮内病变的不典型鳞状细胞（ASC - H）。②低级别鳞状上皮内病变（LSIL）：宫颈上皮内瘤变（CIN）Ⅰ级。③高级别鳞状上皮内病变（HSIL）：包括鳞状上皮细胞中、重度不典型增生（即CINⅡ、CINⅢ）和原位癌。④鳞状细胞癌：角化型鳞癌、非角化型鳞癌、小细胞型鳞癌。

（4）腺上皮细胞改变  ①不典型腺上皮细胞（AGC），包括宫颈管细胞AGC和子宫内膜细胞AGC。②腺原位癌（AIS）。③腺癌。

（5）其他  如不能分类的癌细胞、其他恶性肿瘤等。

（6）激素水平的评估   生殖道脱落细胞检查有助于评估激素水平。

细胞学上诊断为ASC - US、LSIL、HSIL者，宫颈癌前病变（CIN）及宫颈癌治疗后随访，均应行HPV检测。