第二节 羊水检查

羊水检查是采用多种实验室技术对羊水成分进行分析的一种产前检查方法。羊水中的胎儿细胞可用于细胞及分子遗传学的检测；羊水中的酶学分析可用于先天性遗传代谢病的筛查；羊水中病原体的检测有助于明确是否存在宫内感染。目前临床上常用于遗传病的产前诊断、宫内感染病原体的检测以及胎儿肺成熟度的判断。

【适应证】

1.遗传病的产前诊断和遗传代谢病的产前筛查。

2.宫内病原体感染的产前诊断。

3.胎儿肺成熟度的判断。

【临床应用】

1.遗传病的产前诊断和遗传代谢病的产前筛查

（1）染色体疾病及基因组疾病：通过羊水细胞培养进行传统的染色体核型分析，可用于诊断染色体的数目异常和结构异常。目前国内外已把染色体微阵列分析（chromosomal microarray analysis，CMA）技术应用于临床，CMA包括比较基因组杂交微阵列（array CGH）和单核苷酸多态微阵列（SNP array）。除了常规的染色体数目异常，还可以在全基因组范围内高分辨地检测出传统核型分析难以发现的染色体微缺失及微重复等微小结构变异。SNP array芯片还可通过SNP分型检出基因组的杂合性丢失（loss of heterozygosity，LOH）与单亲二倍体（uniparental disomy，UPD）。荧光原位杂交技术和定量PCR（quantitative polymerase chain reaction，qPCR）技术主要用于常见的染色体疾病与基因组疾病的靶向检测。

（2）基因疾病：从羊水细胞提取胎儿DNA，针对目标基因作直接或间接分析。随着人类基因组学研究的深入，越来越多的致病基因被发现，也积累了大量的基因型和表型相关联的证据。基因检测技术已成熟应用于遗传基因疾病的诊断，包括Sanger测序（Sanger sequencing）、多重连接依赖式探针扩增技术（MLPA）、定量PCR技术、DNA印迹（southern blotting)、长片段PCR技术(long PCR)和高通量测序(next-generationsequencing，NGS)技术等，其中Sanger测序是目前基因突变检测的“金标准”。MLPA适用于未知基因缺失与重复的高通量检测，除对基因缺失的定性检测外，还具有检测靶点拷贝数的相对定量能力，能对基因片段的杂合缺失及重复进行判断；高通量测序技术主要包括全基因组测序（whole genome sequencing，WGS）技术和靶向重测序（targeted resequencing）技术。靶向重测序技术分为全外显子测序技术、临床外显子测序（medical exome sequencing，MES）技术、靶向疾病基因包panel等。目前能进行产前诊断的基因病已达3000余种，常见的包括地中海贫血、苯丙酮尿症、甲型及乙型血友病、假肥大型进行性肌营养不良症（DMD）、遗传性脊肌萎缩症（SMA）及脆性X综合征等。

遗传代谢病的产前筛查：通过羊水酶学分析，可诊断因遗传基因突变引起的某种蛋白质或酶的异常或缺陷。目前已知蛋白质功能的遗传性代谢性疾病多由酶的活性丧失而引起。酶催化活性的丧失可以引起底物的累积、代谢产物的缺失等一系列生化反应。如测定氨基已糖酶A活力，可诊断类脂质蓄积引起的黑蒙性家族痴呆病；测定半乳糖-l-磷酸盐尿苷酰转移酶，可诊断半乳糖血症等。

2.宫内感染的产前诊断  当怀疑孕妇有弓形虫、巨细胞病毒等感染时，可行羊水中病毒DNA或RNA的定量分析以帮助诊断是否存在胎儿宫内感染。羊水培养是诊断宫内细菌感染的可靠依据，羊水涂片革兰染色检查、葡萄糖水平测定、白细胞计数、白细胞介素-6检测等可用于绒毛膜羊膜炎的产前诊断。

3.胎儿肺成熟度检查  用于高危妊娠在引产前胎儿肺成熟度的评估，以帮助决定分娩时机。

（1）卵磷脂／鞘磷脂比值测定：胎儿肺泡Ⅱ型上皮细胞分泌的表面活性物质，能使胎肺表面张力减低，有助于预防新生儿呼吸窘迫综合征（neonatal respiratory distress syndrome，NRDS）的发生。肺泡表面活性物质的主要成分为磷脂，羊水L/S比值可用于判断胎肺的成熟度。L/S＞2提示胎儿肺成熟。

（2）磷脂酰甘油（phosphatidyI glycerol，PG）测定：占肺泡表面活性物质中总磷脂的10%，其测定判断胎儿肺成熟度优于LIS比值法。妊娠35周后羊水中出现PG，代表胎儿肺已成熟，以后继续增长至分娩。例如，糖尿病合并妊娠时，即使L/S比值＞2，而未出现PG，则提示胎儿肺仍不成熟。